冷冻过程中的降温是技术的难点,因为在0℃至-80℃的温度下,的形态和功能会遭到损害,甚至导致的。为了减少和避免降温过程对的损伤,必须让快速度过这一阶段,为此不仅要考虑降温的速率,还要考虑在结冰时产热的影响,所以用到倍玛特程序降温仪(冷冻仪)这一设备。终冷冻的将储存于-196℃的液氮罐中。 合肥倍玛特仪器设备有限公司欢迎您的咨询!
步骤:(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、,逐滴加入二亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞,用加的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
程序控制冷冻装置俗称:程序降温仪,也称为程序冷冻仪、胚胎冷冻仪、细胞冷冻仪、程控降温仪;广泛用于冻存细胞、胚胎等。采用微机控制技术,软件,能较准确地控制液氮的施放量,从而保证被冻存的生物制品以适宜的冷冻速率降温冷冻。该仪器具有操作简便、人机界面清楚。 我国临床低温医学工作发展迅速,促进了移植医学的发展,特别是在、造 血、皮肤、、腺体、以及血管和瓣膜等的冷冻保存和移植应用取 得了显著成绩。程序降温仪其主要功能是:可以根据各种被冻存样品不同的需求,选择一种适合的降温速度进行冷冻。从而使被冻样品的复苏成活率得到很大的提升。由于智能程序降温仪的使用很灵活简便,该仪器特别适用于:探索和优化各种被冻样品的冻存方案。上位机软件按照用户的编程,计算出当前的目标温度与实测温度的偏差值,用比例、微分、积分算法算出控制量。通过PDI输出电路去控制电磁阀的开关。当电磁阀开通时,液氮喷入冷冻室,风扇使液氮雾化并均匀地在箱内循环。改变电磁阀的开关频率,就控制了箱内的降温速度原文链接:http://www.ximin.net/caigou/37.html,转载和复制请保留此链接。
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